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產(chǎn)品分類Product categories

D2810-Solarbio DNA退火緩沖液

供應(yīng)數(shù)量：	874
發(fā)布日期：	2025/2/25
有效日期：	2025/8/25
原產(chǎn) 地：
已獲點(diǎn)擊：	874
產(chǎn)品報(bào)價(jià)：

[詳細(xì)資料]

把要退火的DNA oligo用經(jīng)滅菌的三蒸水配制成50μM。解凍Annealing Buffer for DNA Oligos(5X)，混勻備用。如經(jīng)常使用，本Buffer可放置2-8℃一個(gè)月。
2. 如下設(shè)置退火反應(yīng)體系：

Annealing Buffer for DNA Oligos(5X)	20μl
DNA oligo A(50μM)	20μl
DNA oligo B(50μM)	20μl
Nuclease-Free Water	40μl
總體積	100μl

按照上述順序依次加入各種試劑，混勻。放入PCR儀。
3. 如下設(shè)置PCR儀進(jìn)行退火反應(yīng)：

步驟	溫度	時(shí)間	說(shuō)明
1	95℃	2分鐘	讓oligo充分變性
2	每8秒下降0.1℃，降25℃(注1)	約90分鐘	退火
3	4℃	長(zhǎng)時(shí)間保持	暫時(shí)存放

注1：如果所用的PCR儀不具備下降0.1℃的功能，也可以設(shè)置為每90秒下降1℃。
4. 退火結(jié)束后可以直接用于連接反應(yīng)，也可以在-20℃凍存?zhèn)溆?。如果退火結(jié)束后打算進(jìn)行酶切等其它反應(yīng)，好用純化試劑盒進(jìn)行純化，或者確保退火產(chǎn)物在反應(yīng)體系中體積不超過(guò)10%，以避免AnnealingBuffer對(duì)后續(xù)的酶反應(yīng)體系的干擾。

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