細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核碎裂，產(chǎn)生凋亡小體，使細(xì)胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。在細(xì)胞凋亡的早期，細(xì)胞對(duì)前向角光散射的能力顯著降低，對(duì)側(cè)向光散射的能力增加或沒(méi)有變化。在細(xì)胞凋亡的晚期，前向和側(cè)向光散射的信號(hào)均降低。因此可通過(guò)流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞光散射的變化觀察細(xì)胞凋亡情況。
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒通常應(yīng)用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)。如果用于組織的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)，則必須把組織消化成單細(xì)胞狀態(tài)，才可以進(jìn)行檢測(cè)。
在使用細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒應(yīng)注意的事項(xiàng)：
1、樣本處理：根據(jù)試劑盒要求，對(duì)細(xì)胞或組織樣本進(jìn)行適當(dāng)處理，如消化、固定、破膜等。
2、熒光染料選擇：若細(xì)胞本身帶有熒光，需選擇與細(xì)胞自發(fā)熒光不同檢測(cè)通道的熒光染料。
3、儀器配置：了解實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)儀器配置，確保能夠準(zhǔn)確檢測(cè)熒光信號(hào)。
4、對(duì)照設(shè)置：設(shè)置適當(dāng)?shù)膶?duì)照實(shí)驗(yàn)，如陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照，以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
