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組織蠟塊制備、切片、染色、結(jié)果掃描

01

關(guān)于組織固定

1、取材方法：器械要足夠鋒利，選擇薄的刀片，鑷子夾取樣本時要格外小心，避免擠壓在標(biāo)本上留下痕跡；

2、取材速度：組織中的抗原在離體后會很容易喪失活性，所以需要迅速將取到的樣本放入相應(yīng)的固定液內(nèi)，如果一只動物取多種器官，優(yōu)先固定消化器官；

3、組織塊大小：標(biāo)本組織體積1 cm x 1 cm x 0.5 cm，不得超過3 cm x 2 cm x 0.5 cm；

4、固定液的選擇：一般情況下，可使用4%組織細(xì)胞固定液（貨號：P1110）；

5、固定液量：固定液的體積要在樣本的10-20倍之間，固定不充分會造成細(xì)胞自溶；

6、固定溫度：常溫即可，無需冷藏，更不需要冷凍！冷凍會造成固定液結(jié)冰，形成的冰晶會嚴(yán)重破壞組織結(jié)構(gòu)；

7、固定時間：一般情況下，4-48小時最佳。

02

關(guān)于新鮮組織

1、取材方法：新鮮組織取材過后要迅速放入液氮中冷凍，隨后轉(zhuǎn)入液氮或者-80度保存；

2、組織已經(jīng)冷凍保存但是后期想要做石蠟切片的，不要直接解凍放于固定液內(nèi)，建議先梯度解凍，解凍完成后再放于固定液內(nèi)固定；

3、需要注意的是，石蠟切片對于組織的形態(tài)保存相對于冰凍切片有明顯的優(yōu)勢，在設(shè)計實驗時充分考慮。

03

關(guān)于組織運輸

1、固定樣本常溫運輸即可；

2、新鮮組織干冰運輸，提前和物流確定好運輸時長。